ຂໍຂອບໃຈທ່ານສໍາລັບການຢ້ຽມຢາມ Nature.com. ເວີຊັນຂອງຕົວທ່ອງເວັບທີ່ທ່ານກໍາລັງໃຊ້ມີການສະຫນັບສະຫນູນ CSS ຈໍາກັດ. ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົນດີທີ່ສຸດ, ພວກເຮົາແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ໂປຣແກຣມທ່ອງເວັບທີ່ໃໝ່ກວ່າ (ຫຼືປິດການນຳໃຊ້ໂໝດຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ໃນ Internet Explorer). ໃນເວລານີ້, ເພື່ອຮັບປະກັນການສະຫນັບສະຫນູນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງ, ພວກເຮົາຈະສະແດງເວັບໄຊທ໌ໂດຍບໍ່ມີຮູບແບບແລະ JavaScript.
ການສ້າງຕົວແບບສັດຂອງການປ່ຽນແປງ modic (MC) ເປັນພື້ນຖານທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບການສຶກສາ MC. ກະຕ່າຍຂາວນິວຊີແລນຫ້າສິບສີ່ໂຕໄດ້ຖືກແບ່ງອອກເປັນກຸ່ມປະຕິບັດການ sham, ກຸ່ມປູກຝັງກ້າມຊີ້ນ (ກຸ່ມ ME) ແລະກຸ່ມປູກຝັງນິວຊີແລນ (ກຸ່ມ NPE). ໃນກຸ່ມ NPE, ແຜ່ນດິດ intervertebral ໄດ້ຖືກເປີດເຜີຍໂດຍວິທີການຜ່າຕັດ lumbar anterolateral ແລະເຂັມຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອເຈາະຮ່າງກາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ L5 ຢູ່ໃກ້ກັບແຜ່ນສຸດທ້າຍ. NP ໄດ້ຖືກສະກັດອອກຈາກແຜ່ນ L1/2 intervertebral ໂດຍເຂັມສັກຢາແລະສັກເຂົ້າໄປໃນມັນ. ເຈາະຮູຢູ່ໃນກະດູກ subchondral. ຂັ້ນຕອນການຜ່າຕັດແລະວິທີການເຈາະໃນກຸ່ມການປູກຝັງກ້າມຊີ້ນແລະກຸ່ມປະຕິບັດການ sham ແມ່ນຄືກັນກັບກຸ່ມ NP implantation. ໃນກຸ່ມ ME, ຊິ້ນສ່ວນຂອງກ້າມຊີ້ນຖືກໃສ່ເຂົ້າໄປໃນຂຸມ, ໃນຂະນະທີ່ຢູ່ໃນກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham, ບໍ່ມີຫຍັງຖືກໃສ່ເຂົ້າໄປໃນຂຸມ. ຫຼັງຈາກການດໍາເນີນງານ, ການສະແກນ MRI ແລະການທົດສອບທາງຊີວະພາບໂມເລກຸນໄດ້ຖືກປະຕິບັດ. ສັນຍານໃນກຸ່ມ NPE ມີການປ່ຽນແປງ, ແຕ່ບໍ່ມີການປ່ຽນແປງສັນຍານທີ່ຊັດເຈນໃນກຸ່ມ sham-operation ແລະກຸ່ມ ME. ການສັງເກດທາງຊີວະວິທະຍາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການຂະຫຍາຍເນື້ອເຍື່ອຜິດປົກກະຕິໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຢູ່ໃນບ່ອນປູກຝັງ, ແລະການສະແດງອອກຂອງ IL-4, IL-17 ແລະ IFN-γ ເພີ່ມຂຶ້ນໃນກຸ່ມ NPE. ການຝັງ NP ເຂົ້າໄປໃນກະດູກ subchondral ສາມາດປະກອບເປັນຕົວແບບສັດຂອງ MC.
ການປ່ຽນແປງຂອງໂມດິກ (MC) ແມ່ນບາດແຜຂອງແຜ່ນກະດູກສັນຫຼັງ ແລະ ໄຂກະດູກທີ່ຢູ່ຕິດກັນທີ່ເຫັນໄດ້ໃນພາບສະທ້ອນແສງແມ່ເຫຼັກ (MRI). ພວກມັນຂ້ອນຂ້າງທົ່ວໄປໃນບຸກຄົນທີ່ມີອາການທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ1. ການສຶກສາຈໍານວນຫຼາຍໄດ້ເນັ້ນຫນັກເຖິງຄວາມສໍາຄັນຂອງ MC ເນື່ອງຈາກການເຊື່ອມໂຍງກັບຄວາມເຈັບປວດກັບຄືນໄປບ່ອນຕ່ໍາ (LBP)2,3. de Roos et al.4 ແລະ Modic et al.5 ເປັນເອກະລາດທໍາອິດອະທິບາຍສາມປະເພດທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງສັນຍານ subchondral ຜິດປົກກະຕິໃນກະດູກກະດູກສັນຫຼັງ. ການປ່ຽນແປງປະເພດ I ແມ່ນ hypointense ໃນລໍາດັບ T1-weighted (T1W) ແລະ hyperintense ໃນລໍາດັບ T2-weighted (T2W). ບາດແຜນີ້ເປີດເຜີຍໃຫ້ເຫັນຮອຍແຕກຂອງ endplates ແລະເນື້ອເຍື່ອ vascular granulation ທີ່ຢູ່ຕິດກັນຢູ່ໃນໄຂກະດູກ. ການປ່ຽນແປງ Modic type II ສະແດງໃຫ້ເຫັນສັນຍານສູງໃນທັງສອງລໍາດັບ T1W ແລະ T2W. ໃນປະເພດຂອງ lesion ນີ້, ການທໍາລາຍ endplate ສາມາດພົບເຫັນ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການທົດແທນໄຂມັນ histological ຂອງໄຂກະດູກທີ່ຢູ່ໃກ້ຄຽງ. ການປ່ຽນແປງແບບ Modic III ສະແດງໃຫ້ເຫັນສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T1W ແລະ T2W. ບາດແຜ Sclerotic ທີ່ສອດຄ້ອງກັບແຜ່ນຮອງໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນ6. MC ຖືກພິຈາລະນາເປັນພະຍາດ pathological ຂອງກະດູກສັນຫຼັງແລະມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງຢ່າງໃກ້ຊິດກັບພະຍາດ degenerative ຫຼາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ 7,8,9.
ພິຈາລະນາຂໍ້ມູນທີ່ມີຢູ່, ການສຶກສາຈໍານວນຫນຶ່ງໄດ້ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈລະອຽດກ່ຽວກັບກົນໄກການ etiology ແລະ pathological ຂອງ MC. Albert et al. ແນະນໍາວ່າ MC ອາດຈະເກີດຈາກ herniation disc8. Hu et al. MC ຖືວ່າເປັນການເສື່ອມໂຊມຂອງແຜ່ນທີ່ຮ້າຍແຮງ10. Kroc ໄດ້ສະເຫນີແນວຄວາມຄິດຂອງ "ການແຕກຫັກຂອງແຜ່ນພາຍໃນ", ເຊິ່ງກ່າວວ່າການບາດເຈັບຂອງແຜ່ນດິດທີ່ຊ້ໍາກັນອາດຈະນໍາໄປສູ່ການ microtears ໃນແຜ່ນສຸດທ້າຍ. ຫຼັງຈາກການສ້າງຮອຍແຕກ, ການທໍາລາຍ endplate ໂດຍ nucleus pulposus (NP) ອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດການຕອບສະຫນອງ autoimmune, ເຊິ່ງນໍາໄປສູ່ການພັດທະນາຂອງ MC11. Ma et al. ແບ່ງປັນທັດສະນະທີ່ຄ້າຍຄືກັນແລະລາຍງານວ່າ NP-induced autoimmunity ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການເກີດພະຍາດຂອງ MC12.
ຈຸລັງຂອງລະບົບພູມຕ້ານທານ, ໂດຍສະເພາະແມ່ນ lymphocytes ຜູ້ຊ່ວຍ CD4+ T, ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການເກີດພະຍາດຂອງລະບົບພູມຕ້ານທານ13. ຊຸດຍ່ອຍ Th17 ທີ່ຄົ້ນພົບບໍ່ດົນມານີ້ຜະລິດ cytokine proinflammatory IL-17, ສົ່ງເສີມການສະແດງອອກຂອງ chemokine, ແລະກະຕຸ້ນ T cells ໃນອະໄວຍະວະທີ່ເສຍຫາຍເພື່ອຜະລິດ IFN-γ14. ຈຸລັງ Th2 ຍັງມີບົດບາດພິເສດໃນການເຮັດໃຫ້ເກີດການຕອບສະຫນອງຂອງພູມຕ້ານທານ. ການສະແດງອອກຂອງ IL-4 ເປັນຕົວແທນຂອງຈຸລັງ Th2 ສາມາດນໍາໄປສູ່ຜົນສະທ້ອນທາງພູມຕ້ານທານທີ່ຮ້າຍແຮງ15.
ເຖິງແມ່ນວ່າການສຶກສາທາງດ້ານການຊ່ວຍຈໍານວນຫຼາຍໄດ້ຖືກດໍາເນີນໃນ MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, ຍັງມີການຂາດຕົວແບບທົດລອງສັດທີ່ເຫມາະສົມທີ່ສາມາດ mimic ຂະບວນການ MC ທີ່ເກີດຂຶ້ນເລື້ອຍໆໃນມະນຸດແລະສາມາດເປັນ. ໃຊ້ເພື່ອສືບສວນ etiology ຫຼືການປິ່ນປົວໃຫມ່ເຊັ່ນການປິ່ນປົວເປົ້າຫມາຍ. ມາຮອດປັດຈຸບັນ, ມີພຽງແຕ່ຕົວແບບສັດຈໍານວນຫນ້ອຍຂອງ MC ໄດ້ຖືກລາຍງານເພື່ອສຶກສາກົນໄກທາງພະຍາດທີ່ຕິດພັນ.
ອີງຕາມທິດສະດີ autoimmune ທີ່ສະເຫນີໂດຍ Albert ແລະ Ma, ການສຶກສານີ້ໄດ້ສ້າງຕັ້ງຮູບແບບ MC rabbit ແບບງ່າຍດາຍແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້ໂດຍການເອົາ NP autotransplanting ຢູ່ໃກ້ກັບແຜ່ນປາຍກະດູກສັນຫຼັງທີ່ເຈາະ. ຈຸດປະສົງອື່ນໆແມ່ນເພື່ອສັງເກດລັກສະນະ histological ຂອງຕົວແບບສັດແລະການປະເມີນກົນໄກສະເພາະຂອງ NP ໃນການພັດທະນາ MC. ເພື່ອເຮັດສິ່ງນີ້, ພວກເຮົານໍາໃຊ້ເຕັກນິກເຊັ່ນ: ຊີວະສາດໂມເລກຸນ, MRI, ແລະການສຶກສາ histological ເພື່ອສຶກສາຄວາມກ້າວຫນ້າຂອງ MC.
ກະຕ່າຍສອງໂຕຕາຍຍ້ອນມີເລືອດອອກໃນລະຫວ່າງການຜ່າຕັດ, ແລະກະຕ່າຍ 4 ໂຕຕາຍໃນລະຫວ່າງການໃຊ້ຢາສະລົບໃນເວລາ MRI. ກະຕ່າຍທີ່ຍັງເຫຼືອ 48 ໂຕລອດຊີວິດມາໄດ້ ແລະບໍ່ມີອາການທາງດ້ານພຶດຕິກຳ ຫຼືລະບົບປະສາດຫຼັງຜ່າຕັດ.
MRI ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າຄວາມເຂັ້ມຂອງສັນຍານຂອງເນື້ອເຍື່ອຝັງຢູ່ໃນຮູຕ່າງໆແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ. ຄວາມເຂັ້ມຂອງສັນຍານຂອງຮ່າງກາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ L5 ໃນກຸ່ມ NPE ຄ່ອຍໆປ່ຽນແປງຢູ່ທີ່ 12, 16 ແລະ 20 ອາທິດຫຼັງຈາກການແຊກຊຶມ (ລໍາດັບ T1W ສະແດງໃຫ້ເຫັນສັນຍານຕ່ໍາ, ແລະລໍາດັບ T2W ສະແດງໃຫ້ເຫັນສັນຍານປະສົມບວກກັບສັນຍານຕ່ໍາ) (ຮູບ 1C), ໃນຂະນະທີ່ MRI ປາກົດ. ຂອງອີກສອງກຸ່ມຂອງພາກສ່ວນທີ່ຝັງຢູ່ແມ່ນຂ້ອນຂ້າງຄົງທີ່ໃນໄລຍະເວລາດຽວກັນ (ຮູບ 1A, B).
(A) ຕົວແທນ MRIs ຕາມລໍາດັບຂອງກະດູກສັນຫຼັງ lumbar rabbit ຢູ່ 3 ຈຸດເວລາ. ບໍ່ພົບຄວາມຜິດປົກກະຕິຂອງສັນຍານຢູ່ໃນຮູບພາບຂອງກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham. (B) ລັກສະນະສັນຍານຂອງຮ່າງກາຍກະດູກສັນຫຼັງໃນກຸ່ມ ME ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບກຸ່ມປະຕິບັດການ sham, ແລະບໍ່ມີການປ່ຽນແປງສັນຍານທີ່ສໍາຄັນແມ່ນສັງເກດເຫັນຢູ່ໃນບ່ອນຝັງຕົວໃນໄລຍະເວລາ. (C) ໃນກຸ່ມ NPE, ສັນຍານຕ່ໍາແມ່ນເຫັນໄດ້ຊັດເຈນຢູ່ໃນລໍາດັບ T1W, ແລະສັນຍານປະສົມແລະສັນຍານຕ່ໍາແມ່ນເຫັນໄດ້ຊັດເຈນໃນລໍາດັບ T2W. ຈາກໄລຍະເວລາ 12 ອາທິດເຖິງໄລຍະເວລາ 20 ອາທິດ, ສັນຍານສູງ sporadic ອ້ອມຂ້າງສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T2W ຫຼຸດລົງ.
hyperplasia ກະດູກທີ່ເຫັນໄດ້ຊັດເຈນສາມາດເຫັນໄດ້ໃນບ່ອນປູກຝັງຂອງກະດູກສັນຫຼັງໃນກຸ່ມ NPE, ແລະ hyperplasia ຂອງກະດູກເກີດຂື້ນໄວຈາກ 12 ຫາ 20 ອາທິດ (ຮູບ 2C) ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມ NPE, ບໍ່ມີການປ່ຽນແປງທີ່ສໍາຄັນໃນ vertebral ແບບຈໍາລອງ. ຮ່າງກາຍ; ກຸ່ມ Sham ແລະກຸ່ມ ME (ຮູບ 2C) 2A,B).
(ກ) ພື້ນຜິວຂອງກະດູກສັນຫຼັງຢູ່ສ່ວນທີ່ຝັງແມ່ນກ້ຽງຫຼາຍ, ຮູຂຸມຂົນປິ່ນປົວໄດ້ດີ, ແລະບໍ່ມີ hyperplasia ຢູ່ໃນຮ່າງກາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ. (B) ຮູບຮ່າງຂອງສະຖານທີ່ປູກຝັງຢູ່ໃນກຸ່ມ ME ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບຢູ່ໃນກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham, ແລະບໍ່ມີການປ່ຽນແປງທີ່ຊັດເຈນໃນຮູບລັກສະນະຂອງສະຖານທີ່ປູກຝັງໃນໄລຍະເວລາ. (C) hyperplasia ກະດູກເກີດຂື້ນຢູ່ບ່ອນປູກຝັງຢູ່ໃນກຸ່ມ NPE. hyperplasia ຂອງກະດູກເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງໄວວາແລະແມ້ກະທັ້ງຂະຫຍາຍຜ່ານແຜ່ນ intervertebral ໄປສູ່ຮ່າງກາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ.
ການວິເຄາະ histological ໃຫ້ຂໍ້ມູນລາຍລະອຽດເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບການສ້າງກະດູກ. ຮູບທີ 3 ສະແດງໃຫ້ເຫັນຮູບຖ່າຍຂອງພາກສ່ວນຫຼັງການຜ່າຕັດທີ່ເປື້ອນດ້ວຍ H&E. ໃນກຸ່ມປະຕິບັດການ sham, chondrocytes ໄດ້ຖືກຈັດລຽງໄດ້ດີແລະບໍ່ມີການກວດພົບການຂະຫຍາຍຈຸລັງ (ຮູບ 3A). ສະຖານະການໃນກຸ່ມ ME ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham (ຮູບ 3B). ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ໃນກຸ່ມ NPE, ຈໍານວນຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງ chondrocytes ແລະການຂະຫຍາຍຕົວຂອງຈຸລັງຄ້າຍຄື NP ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຢູ່ໃນບ່ອນປູກຝັງ (ຮູບ 3C);
(A) Trabeculae ສາມາດເຫັນໄດ້ຢູ່ໃກ້ກັບແຜ່ນສຸດທ້າຍ, chondrocytes ຖືກຈັດລຽງຢ່າງເປັນລະບຽບດ້ວຍຂະຫນາດແລະຮູບຮ່າງຂອງຈຸລັງທີ່ເປັນເອກະພາບແລະບໍ່ມີການຂະຫຍາຍພັນ (40 ເທື່ອ). (ຂ) ສະພາບຂອງບ່ອນປູກຝັງຢູ່ໃນກຸ່ມ ME ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບກຸ່ມ sham. Trabeculae ແລະ chondrocytes ສາມາດເຫັນໄດ້, ແຕ່ບໍ່ມີການແຜ່ຂະຫຍາຍຢ່າງຈະແຈ້ງໃນສະຖານທີ່ implantation (40 ເທື່ອ). (B) ມັນສາມາດເຫັນໄດ້ວ່າ chondrocytes ແລະຈຸລັງຄ້າຍຄື NP proliferate ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ, ແລະຮູບຮ່າງແລະຂະຫນາດຂອງ chondrocytes ແມ່ນບໍ່ສະເຫມີກັນ (40 ເທື່ອ).
ການສະແດງອອກຂອງ interleukin 4 (IL-4) mRNA, interleukin 17 (IL-17) mRNA, ແລະ interferon γ (IFN-γ) mRNA ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນໃນທັງສອງກຸ່ມ NPE ແລະ ME. ເມື່ອລະດັບການສະແດງອອກຂອງ genes ເປົ້າຫມາຍໄດ້ຖືກປຽບທຽບ, ການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອສາຍຂອງ IL-4, IL-17, ແລະ IFN-γ ແມ່ນເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນກຸ່ມ NPE ເມື່ອທຽບກັບກຸ່ມ ME ແລະກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham (ຮູບ 4). (P < 0.05). ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham, ລະດັບການສະແດງອອກຂອງ IL-4, IL-17, ແລະ IFN-γ ໃນກຸ່ມ ME ເພີ່ມຂຶ້ນພຽງແຕ່ເລັກນ້ອຍແລະບໍ່ສາມາດບັນລຸການປ່ຽນແປງທາງສະຖິຕິ (P> 0.05).
ການສະແດງອອກ mRNA ຂອງ IL-4, IL-17 ແລະ IFN-γ ໃນກຸ່ມ NPE ສະແດງໃຫ້ເຫັນແນວໂນ້ມທີ່ສູງຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍກ່ວາກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham ແລະກຸ່ມ ME (P <0.05).
ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ລະດັບການສະແດງອອກໃນກຸ່ມ ME ບໍ່ມີຄວາມແຕກຕ່າງກັນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ (P> 0.05).
ການວິເຄາະ blot ຕາເວັນຕົກໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ພູມຕ້ານທານທີ່ມີການຄ້າຕໍ່ກັບ IL-4 ແລະ IL-17 ເພື່ອຢືນຢັນຮູບແບບການສະແດງອອກ mRNA ທີ່ຖືກປ່ຽນແປງ. ດັ່ງທີ່ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 5A,B, ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມ ME ແລະກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham, ລະດັບທາດໂປຼຕີນຂອງ IL-4 ແລະ IL-17 ໃນກຸ່ມ NPE ແມ່ນເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ (P <0.05). ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມປະຕິບັດງານ sham, ລະດັບທາດໂປຼຕີນຂອງ IL-4 ແລະ IL-17 ໃນກຸ່ມ ME ຍັງບໍ່ສາມາດບັນລຸການປ່ຽນແປງທີ່ສໍາຄັນທາງສະຖິຕິ (P> 0.05).
(A) ລະດັບທາດໂປຼຕີນຂອງ IL-4 ແລະ IL-17 ໃນກຸ່ມ NPE ແມ່ນສູງກວ່າກຸ່ມ ME ແລະກຸ່ມ placebo (P < 0.05). (B) ຮິສໂຕແກຣມ blot ຕາເວັນຕົກ.
ເນື່ອງຈາກຈໍານວນຕົວຢ່າງຂອງມະນຸດທີ່ມີຈໍານວນຈໍາກັດທີ່ໄດ້ຮັບໃນລະຫວ່າງການຜ່າຕັດ, ການສຶກສາທີ່ຊັດເຈນແລະລາຍລະອຽດກ່ຽວກັບ pathogenesis ຂອງ MC ແມ່ນມີຄວາມຫຍຸ້ງຍາກບາງຢ່າງ. ພວກເຮົາພະຍາຍາມສ້າງຕົວແບບສັດຂອງ MC ເພື່ອສຶກສາກົນໄກທາງພະຍາດທີ່ມີທ່າແຮງຂອງມັນ. ໃນເວລາດຽວກັນ, ການປະເມີນຜົນທາງ radiological, ການປະເມີນຜົນ histological ແລະການປະເມີນຜົນທາງຊີວະພາບໂມເລກຸນໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອປະຕິບັດຕາມຫຼັກສູດຂອງ MC induced ໂດຍ NP autograft. ດັ່ງນັ້ນ, ຮູບແບບ NP implantation ສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການປ່ຽນແປງເທື່ອລະກ້າວໃນຄວາມເຂັ້ມຂອງສັນຍານຈາກ 12 ອາທິດເປັນຈຸດເວລາ 20 ອາທິດ (ປະສົມສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T1W ແລະສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T2W), ຊີ້ໃຫ້ເຫັນການປ່ຽນແປງຂອງເນື້ອເຍື່ອ, ແລະ histological ແລະໂມເລກຸນ. ການປະເມີນຜົນທາງຊີວະວິທະຍາໄດ້ຢືນຢັນຜົນຂອງການສຶກສາທາງລັງສີ.
ຜົນໄດ້ຮັບຂອງການທົດລອງນີ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປ່ຽນແປງທາງສາຍຕາແລະ histological ເກີດຂື້ນຢູ່ທີ່ສະຖານທີ່ຂອງການລະເມີດຮ່າງກາຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງໃນກຸ່ມ NPE. ໃນເວລາດຽວກັນ, ການສະແດງອອກຂອງພັນທຸກໍາ IL-4, IL-17 ແລະ IFN-γ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບ IL-4, IL-17 ແລະ IFN-γ ໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນ, ເຊິ່ງຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການລະເມີດຂອງເນື້ອເຍື່ອນິວເຄຍຂອງ autologous pulposus ໃນກະດູກສັນຫຼັງ. ຮ່າງກາຍອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດການປ່ຽນແປງຂອງສັນຍານແລະ morphological. ມັນງ່າຍທີ່ຈະພົບວ່າຄຸນລັກສະນະສັນຍານຂອງກະດູກສັນຫຼັງຂອງຕົວແບບສັດ (ສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T1W, ສັນຍານປະສົມແລະສັນຍານຕ່ໍາໃນລໍາດັບ T2W) ແມ່ນຄ້າຍຄືກັນກັບຈຸລັງກະດູກສັນຫຼັງຂອງມະນຸດ, ແລະຄຸນລັກສະນະ MRI ຍັງ. ຢືນຢັນການສັງເກດການຂອງ histology ແລະການວິພາກວິພາກລວມ, ນັ້ນແມ່ນ, ການປ່ຽນແປງຂອງຈຸລັງຂອງຮ່າງກາຍກະດູກສັນຫຼັງແມ່ນມີຄວາມຄືບຫນ້າ. ເຖິງແມ່ນວ່າການຕອບສະຫນອງອັກເສບທີ່ເກີດຈາກການບາດເຈັບສ້ວຍແຫຼມອາດຈະປາກົດໃນໄວໆນີ້ຫຼັງຈາກການເຈາະ, ຜົນໄດ້ຮັບຂອງ MRI ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າການປ່ຽນແປງສັນຍານທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງປະກົດວ່າ 12 ອາທິດຫຼັງຈາກ puncture ແລະຍັງຄົງຢູ່ເຖິງ 20 ອາທິດໂດຍບໍ່ມີອາການຂອງການຟື້ນຕົວຫຼືການປ່ຽນແປງຂອງ MRI. ຜົນໄດ້ຮັບເຫຼົ່ານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າ autologous vertebral NP ເປັນວິທີການທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ສໍາລັບການສ້າງຕັ້ງ MV ກ້າວຫນ້າໃນ rabbits.
ຮູບແບບການເຈາະນີ້ຕ້ອງການທັກສະ, ເວລາ, ແລະຄວາມພະຍາຍາມໃນການຜ່າຕັດທີ່ພຽງພໍ. ໃນການທົດລອງເບື້ອງຕົ້ນ, ການຜ່າຕັດຫຼືການກະຕຸ້ນຫຼາຍເກີນໄປຂອງໂຄງສ້າງ ligamentous paravertebral ອາດຈະເຮັດໃຫ້ການສ້າງກະດູກສັນຫຼັງ osteophytes. ຄວນລະມັດລະວັງບໍ່ໃຫ້ທໍາລາຍຫຼືລະຄາຍເຄືອງແຜ່ນທີ່ຕິດກັນ. ເນື່ອງຈາກຄວາມເລິກຂອງການເຈາະຕ້ອງໄດ້ຮັບການຄວບຄຸມເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຜົນທີ່ສອດຄ່ອງແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້, ພວກເຮົາເຮັດປລັກສຽບດ້ວຍຕົນເອງໂດຍການຕັດປາຍຂອງເຂັມຍາວ 3 ມມ. ການນໍາໃຊ້ສຽບນີ້ເຮັດໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າຄວາມເລິກເຈາະເປັນເອກະພາບໃນຮ່າງກາຍ vertebral. ໃນການທົດລອງເບື້ອງຕົ້ນ, ສາມແພດຜ່າຕັດ orthopedic ທີ່ມີສ່ວນຮ່ວມໃນການດໍາເນີນງານພົບວ່າເຂັມ 16-gauge ງ່າຍຕໍ່ການເຮັດວຽກກັບເຂັມ 18-gauge ຫຼືວິທີການອື່ນໆ. ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການມີເລືອດອອກຫຼາຍເກີນໄປໃນລະຫວ່າງການຂຸດເຈາະ, ການຈັບເຂັມໄວ້ເປັນໄລຍະຫນຶ່ງຈະເຮັດໃຫ້ຮູສຽບທີ່ເຫມາະສົມກວ່າ, ແນະນໍາວ່າລະດັບທີ່ແນ່ນອນຂອງ MC ສາມາດຄວບຄຸມດ້ວຍວິທີນີ້.
ເຖິງແມ່ນວ່າການສຶກສາຈໍານວນຫຼາຍໄດ້ເປົ້າຫມາຍ MC, ຫນ້ອຍແມ່ນເປັນທີ່ຮູ້ຈັກກ່ຽວກັບ etiology ແລະ pathogenesis ຂອງ MC25,26,27. ອີງຕາມການສຶກສາທີ່ຜ່ານມາຂອງພວກເຮົາ, ພວກເຮົາພົບວ່າ autoimmunity ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການເກີດຂື້ນແລະການພັດທະນາຂອງ MC12. ການສຶກສານີ້ໄດ້ກວດເບິ່ງການສະແດງອອກທາງດ້ານປະລິມານຂອງ IL-4, IL-17, ແລະ IFN-γ, ເຊິ່ງເປັນເສັ້ນທາງຄວາມແຕກຕ່າງຕົ້ນຕໍຂອງຈຸລັງ CD4+ ຫຼັງຈາກການກະຕຸ້ນ antigen. ໃນການສຶກສາຂອງພວກເຮົາ, ເມື່ອປຽບທຽບກັບກຸ່ມລົບ, ກຸ່ມ NPE ມີການສະແດງອອກສູງກວ່າ IL-4, IL-17, ແລະ IFN-γ, ແລະລະດັບທາດໂປຼຕີນຂອງ IL-4 ແລະ IL-17 ຍັງສູງກວ່າ.
ທາງດ້ານຄລີນິກ, ການສະແດງອອກຂອງ IL-17 mRNA ແມ່ນເພີ່ມຂຶ້ນໃນຈຸລັງ NP ຈາກຄົນເຈັບທີ່ມີແຜ່ນ herniation28. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງລະດັບການສະແດງອອກຂອງ IL-4 ແລະ IFN-γ ຍັງໄດ້ຖືກພົບເຫັນຢູ່ໃນຮູບແບບ herniation disc acute ທີ່ບໍ່ບີບອັດທຽບກັບການຄວບຄຸມທີ່ມີສຸຂະພາບດີ29. IL-17 ມີບົດບາດສໍາຄັນໃນການອັກເສບ, ການບາດເຈັບຂອງເນື້ອເຍື່ອໃນພະຍາດ autoimmune30 ແລະເສີມຂະຫຍາຍການຕອບສະຫນອງຂອງພູມຕ້ານທານກັບ IFN-γ31. ການບາດເຈັບເນື້ອເຍື່ອທີ່ປັບປຸງ IL-17-mediated ໄດ້ຖືກລາຍງານຢູ່ໃນ MRL/lpr mice32 ແລະ autoimmunity-ssuceptible mice33. IL-4 ສາມາດຍັບຍັ້ງການສະແດງອອກຂອງ cytokines proinflammatory (ເຊັ່ນ IL-1β ແລະ TNFα) ແລະ macrophage activation34. ມັນໄດ້ຖືກລາຍງານວ່າການສະແດງອອກ mRNA ຂອງ IL-4 ແມ່ນແຕກຕ່າງກັນໃນກຸ່ມ NPE ເມື່ອທຽບກັບ IL-17 ແລະ IFN-γ ໃນເວລາດຽວກັນ; ການສະແດງອອກ mRNA ຂອງ IFN-γ ໃນກຸ່ມ NPE ແມ່ນສູງກວ່າກຸ່ມອື່ນໆຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ. ດັ່ງນັ້ນ, ການຜະລິດ IFN-γ ອາດຈະເປັນຕົວໄກ່ເກ່ຍຂອງການຕອບສະຫນອງອັກເສບທີ່ກະຕຸ້ນໂດຍ NP intercalation. ການສຶກສາໄດ້ສະແດງໃຫ້ເຫັນວ່າ IFN-γ ແມ່ນຜະລິດໂດຍຈຸລັງຫຼາຍຊະນິດ, ລວມທັງ activated type 1 helper T cells, natural killer cells, and macrophages35,36, and is a key pro-inflammatory cytokine that promote immune response37.
ການສຶກສານີ້ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າການຕອບສະຫນອງ autoimmune ອາດຈະມີສ່ວນຮ່ວມໃນການເກີດຂື້ນແລະການພັດທະນາຂອງ MC. Luoma et al. ພົບວ່າຄຸນລັກສະນະສັນຍານຂອງ MC ແລະ NP ທີ່ໂດດເດັ່ນແມ່ນຄ້າຍຄືກັນໃນ MRI, ແລະທັງສອງສະແດງສັນຍານສູງໃນ T2W sequence38. ບາງ cytokines ໄດ້ຖືກຢືນຢັນວ່າມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງຢ່າງໃກ້ຊິດກັບການປະກົດຕົວຂອງ MC, ເຊັ່ນ IL-139. Ma et al. ແນະນໍາວ່າການຂຶ້ນຫຼືຫຼຸດລົງຂອງ NP ອາດຈະມີອິດທິພົນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຕໍ່ການປະກົດຕົວແລະການພັດທະນາຂອງ MC12. Bobechko40 ແລະ Herzbein et al.41 ລາຍງານວ່າ NP ເປັນເນື້ອເຍື່ອພູມຕ້ານທານທີ່ບໍ່ສາມາດເຂົ້າໄປໃນການໄຫຼວຽນຂອງເສັ້ນເລືອດຕັ້ງແຕ່ເກີດ. NP protrusions ແນະນໍາອົງການຈັດຕັ້ງຕ່າງປະເທດເຂົ້າໄປໃນການສະຫນອງເລືອດ, ດັ່ງນັ້ນການໄກ່ເກ່ຍປະຕິກິລິຍາ autoimmune ທ້ອງຖິ່ນ42. ປະຕິກິລິຍາ autoimmune ສາມາດກະຕຸ້ນປັດໃຈພູມຕ້ານທານຈໍານວນຫລາຍ, ແລະເມື່ອປັດໃຈເຫຼົ່ານີ້ຖືກເປີດເຜີຍຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງກັບເນື້ອເຍື່ອ, ພວກມັນສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດການປ່ຽນແປງໃນ signaling43. ໃນການສຶກສານີ້, ການສະແດງຫຼາຍເກີນໄປຂອງ IL-4, IL-17 ແລະ IFN-γ ແມ່ນປັດໃຈພູມຕ້ານທານປົກກະຕິ, ພິສູດຄວາມສໍາພັນໃກ້ຊິດລະຫວ່າງ NP ແລະ MCs44. ຮູບແບບສັດນີ້ mimics ດີ NP breakthrough ແລະການເຂົ້າໄປໃນແຜ່ນສຸດທ້າຍ. ຂະບວນການນີ້ຍັງເປີດເຜີຍຜົນກະທົບຂອງ autoimmunity ກ່ຽວກັບ MC.
ດັ່ງທີ່ຄາດໄວ້, ຮູບແບບສັດນີ້ເຮັດໃຫ້ພວກເຮົາມີເວທີທີ່ເປັນໄປໄດ້ເພື່ອສຶກສາ MC. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຮູບແບບນີ້ຍັງມີຂໍ້ຈໍາກັດບາງຢ່າງ: ທໍາອິດ, ໃນໄລຍະການສັງເກດສັດ, ບາງໄລຍະກາງຂອງ rabbits ຕ້ອງໄດ້ຮັບການ euthanized ສໍາລັບ histological ແລະ molecular biology ການທົດສອບ, ດັ່ງນັ້ນສັດບາງຊະນິດ "ບໍ່ມີປະໂຫຍດ" ໃນໄລຍະເວລາ. ອັນທີສອງ, ເຖິງແມ່ນວ່າສາມຈຸດເວລາຖືກກໍານົດໄວ້ໃນການສຶກສານີ້, ແຕ່ຫນ້າເສຍດາຍ, ພວກເຮົາພຽງແຕ່ສ້າງແບບຈໍາລອງຫນຶ່ງປະເພດຂອງ MC (Modic type I change), ດັ່ງນັ້ນມັນບໍ່ພຽງພໍທີ່ຈະເປັນຕົວແທນຂອງຂະບວນການພັດທະນາພະຍາດຂອງມະນຸດ, ແລະຈຸດເວລາຫຼາຍຕ້ອງໄດ້ຮັບການຕັ້ງຄ່າ. ດີກວ່າສັງເກດການປ່ຽນແປງສັນຍານທັງຫມົດ. ອັນທີສາມ, ການປ່ຽນແປງຂອງໂຄງສ້າງເນື້ອເຍື່ອສາມາດສະແດງໃຫ້ເຫັນຢ່າງຊັດເຈນໂດຍການສີຍ້ອມທາງ histological, ແຕ່ບາງເຕັກນິກພິເສດສາມາດເປີດເຜີຍການປ່ຽນແປງຂອງໂຄງສ້າງຈຸນລະພາກໃນຕົວແບບນີ້. ຕົວຢ່າງເຊັ່ນ, ກ້ອງຈຸລະທັດທີ່ມີແສງສະຫວ່າງຂົ້ວໂລກໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະການສ້າງຕັ້ງຂອງ fibrocartilage ໃນ rabbit intervertebral discs45. ຜົນກະທົບໃນໄລຍະຍາວຂອງ NP ກ່ຽວກັບ MC ແລະ endplate ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການສຶກສາຕື່ມອີກ.
ກະຕ່າຍສີຂາວຊາຍຊາວນິວຊີແລນຫ້າສິບສີ່ໂຕ (ນ້ຳໜັກປະມານ 2.5-3 ກິໂລ, ອາຍຸ 3-3.5 ເດືອນ) ໄດ້ຖືກແບ່ງອອກເປັນກຸ່ມປະຕິບັດການ sham, ກຸ່ມປູກຝັງກ້າມຊີ້ນ (ກຸ່ມ ME) ແລະ ກຸ່ມປູກຝັງຮາກເສັ້ນປະສາດ (ກຸ່ມ NPE). ຂັ້ນຕອນການທົດລອງທັງໝົດໄດ້ຮັບການອະນຸມັດຈາກຄະນະກໍາມະການດ້ານຈັນຍາບັນຂອງໂຮງໝໍທຽນຈິນ, ແລະວິທີການທົດລອງໄດ້ຖືກປະຕິບັດຢ່າງເຂັ້ມງວດຕາມຄໍາແນະນໍາທີ່ໄດ້ຮັບການອະນຸມັດ.
ໄດ້ມີການປັບປຸງບາງເຕັກນິກການຜ່າຕັດຂອງ S. Sobajima 46 . ກະຕ່າຍແຕ່ລະໂຕຖືກຈັດໃສ່ໃນຕຳແໜ່ງທາງຂ້າງ ແລະ ດ້ານໜ້າຂອງແຜ່ນດິດ intervertebral lumbar ຫ້າອັນຕິດຕໍ່ກັນ (IVDs) ໄດ້ຖືກເປີດເຜີຍໂດຍໃຊ້ວິທີການ posterolateral retroperitoneal. ກະຕ່າຍແຕ່ລະໂຕໄດ້ຮັບຢາສລົບທົ່ວໄປ (20% urethane, 5 ml/kg ຜ່ານເສັ້ນກ່າງໃບຫູ). ການຜ່າຕັດຕາມລວງຍາວຂອງຜິວໜັງແມ່ນເຮັດຈາກຂອບລຸ່ມຂອງກະດູກຂ້າງເຖິງຂອບກະດູກກະໂພກ, 2 ຊມ ventral ຫາກ້າມຊີ້ນ paravertebral. ກະດູກສັນຫຼັງດ້ານຂ້າງເບື້ອງຂວາຈາກ L1 ຫາ L6 ໄດ້ຖືກເປີດເຜີຍໂດຍການຜ່າຕັດແຫຼມ ແລະ blunt ຂອງເນື້ອເຍື່ອຍ່ອຍ, ເນື້ອເຍື່ອ retroperitoneal ແລະກ້າມຊີ້ນ (ຮູບ 6A). ລະດັບແຜ່ນດິດໄດ້ຖືກກໍານົດໂດຍໃຊ້ຂອບຂອງກະດູກທ້ອງເປັນຈຸດສໍາຄັນທາງວິພາກສໍາລັບລະດັບແຜ່ນ L5-L6. ໃຊ້ເຂັມເຈາະ 16-gauge ເພື່ອເຈາະຮູຢູ່ໃກ້ກັບແຜ່ນທ້າຍຂອງກະດູກສັນຫຼັງ L5 ທີ່ມີຄວາມເລິກ 3 ມມ (ຮູບ 6B). ໃຊ້ syringe ຂະໜາດ 5 ມລ ເພື່ອດູດເອົາ autologous nucleus pulposus ໃນແຜ່ນ L1-L2 intervertebral (ຮູບ 6C). ເອົາ nucleus pulposus ຫຼືກ້າມຊີ້ນອອກຕາມຄວາມຕ້ອງການຂອງແຕ່ລະກຸ່ມ. ຫຼັງຈາກຂຸມເຈາະໄດ້ເລິກລົງ, ຜ້າເຊັດທີ່ດູດຊຶມໄດ້ຖືກວາງໄວ້ໃນ fascia ເລິກ, fascia superficial ແລະຜິວຫນັງ, ການດູແລບໍ່ໃຫ້ທໍາລາຍເນື້ອເຍື່ອ periosteal ຂອງຮ່າງກາຍກະດູກສັນຫຼັງໃນລະຫວ່າງການຜ່າຕັດ.
(A) ແຜ່ນ L5–L6 ໄດ້ຖືກເປີດເຜີຍຜ່ານທາງຫຼັງຂອງລະບົບທາງຫຼັງຂອງທາງຫຼັງ. (B) ໃຊ້ເຂັມ 16-gauge ເຈາະຮູຢູ່ໃກ້ກັບ L5 endplate. (C) Autologous MFs ຖືກຂຸດຄົ້ນ.
ອາການສລົບທົ່ວໄປແມ່ນໃຊ້ດ້ວຍ urethane 20% (5 ມລ/ກິໂລ) ບໍລິຫານຜ່ານເສັ້ນກ່າງໃບຫູ, ແລະການຖ່າຍພາບກະດູກສັນຫຼັງ lumbar ຊໍ້າຄືນໃນເວລາ 12, 16, ແລະ 20 ອາທິດຫຼັງຜ່າຕັດ.
ກະຕ່າຍໄດ້ຖືກເສຍສະລະໂດຍການສີດເຂົ້າກ້າມຂອງ ketamine (25.0 mg/kg) ແລະ sodium pentobarbital (1.2 g/kg) ພາຍໃນ 12, 16 ແລະ 20 ອາທິດຫຼັງຈາກການຜ່າຕັດ. ກະດູກສັນຫຼັງທັງຫມົດໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍອອກສໍາລັບການວິເຄາະ histological ແລະການວິເຄາະທີ່ແທ້ຈິງໄດ້ຖືກປະຕິບັດ. ການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບປະລິມານ (RT-qPCR) ແລະ blotting ຕາເວັນຕົກໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກວດພົບການປ່ຽນແປງຂອງປັດໃຈພູມຕ້ານທານ.
ການກວດ MRI ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຢູ່ໃນກະຕ່າຍໂດຍໃຊ້ແມ່ເຫຼັກທາງດ້ານຄລີນິກ 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) ທີ່ຕິດຕັ້ງດ້ວຍເຄື່ອງຮັບສາຍແຂນຂາ. ກະຕ່າຍຖືກຢາສລົບດ້ວຍ urethane 20% (5 mL/kg) ຜ່ານເສັ້ນກ່າງໃບຫູ ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນວາງໄວ້ເທິງຫຼັງຂອງແມ່ເຫຼັກທີ່ມີພື້ນທີ່ lumbar ຕັ້ງຢູ່ໃຈກາງຂອງເສັ້ນຜ່າສູນກາງ 5 ນິ້ວຂອງເສັ້ນຜ່າສູນກາງດ້ານວົງມົນ (GE Medical Systems). ຮູບພາບທ້ອງຖິ່ນທີ່ມີນໍ້າໜັກ Coronal T2 (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) ໄດ້ມາເພື່ອກໍານົດສະຖານທີ່ຂອງແຜ່ນ lumbar ຈາກ L3–L4 ຫາ L5–L6. Sagittal plane T2-weighted slices are acquired with the following settings: fast spin-echo sequence with a repetition time (TR) of 2200 ms and an echo time (TE) of 70 ms, matrix; ພາກສະຫນາມສາຍຕາຂອງ 260 ແລະແປດ stimuli; ຄວາມຫນາຂອງການຕັດແມ່ນ 2 ມມ, ຊ່ອງຫວ່າງແມ່ນ 0.2 ມມ.
ຫຼັງຈາກການຖ່າຍຮູບຄັ້ງສຸດທ້າຍແລະກະຕ່າຍສຸດທ້າຍໄດ້ຖືກຂ້າຕາຍ, ແຜ່ນ sham, ກ້າມຊີ້ນຝັງ, ແລະແຜ່ນ NP ໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍອອກເພື່ອກວດຫາທາງຊີວະວິທະຍາ. ເນື້ອເຍື່ອໄດ້ຖືກແກ້ໄຂໃນ 10% ທີ່ເປັນກາງ buffered formalin ສໍາລັບ 1 ອາທິດ, decalcified ດ້ວຍ ethylenediaminetetraacetic ອາຊິດ, ແລະ paraffin sectioned. ກ້ອນເນື້ອເຍື່ອໄດ້ຖືກຝັງຢູ່ໃນ paraffin ແລະຕັດເຂົ້າໄປໃນສ່ວນ sagittal (5 μmຫນາ) ໂດຍໃຊ້ microtome. ພາກສ່ວນຕ່າງໆໄດ້ຖືກຍ້ອມດ້ວຍ hematoxylin ແລະ eosin (H&E).
ຫຼັງຈາກການເກັບກໍາແຜ່ນ intervertebral ຈາກກະຕ່າຍໃນແຕ່ລະກຸ່ມ, RNA ທັງຫມົດໄດ້ຖືກສະກັດອອກໂດຍໃຊ້ຖັນ UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., ຈີນ) ຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງຜູ້ຜະລິດແລະລະບົບການຖອດຂໍ້ຄວາມແບບປີ້ນກັບ ImProm II (Promega Inc. , Madison, WI, USA). ການຖອດຂໍ້ຄວາມຍ້ອນກັບໄດ້ຖືກປະຕິບັດ.
RT-qPCR ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) ແລະ SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງຜູ້ຜະລິດ. ປະລິມານປະຕິກິລິຍາ PCR ແມ່ນ 20 μlແລະມີ 1.5 μlຂອງ cDNA ເຈືອຈາງແລະ 0.2 μM ຂອງແຕ່ລະ primer. Primers ໄດ້ຖືກອອກແບບໂດຍ OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) ແລະຜະລິດໂດຍ Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (ຈີນ) (ຕາຕະລາງ 1). ເງື່ອນໄຂວົງຈອນຄວາມຮ້ອນຕໍ່ໄປນີ້ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້: ຂັ້ນຕອນການກະຕຸ້ນໂພລີເມີເຣດເບື້ອງຕົ້ນຢູ່ທີ່ 94 ° C ສໍາລັບ 2 ນາທີ, ຫຼັງຈາກນັ້ນ 40 ຮອບຂອງ 15 s ແຕ່ລະຢູ່ທີ່ 94 ° C ສໍາລັບ template denaturation, annealing ສໍາລັບ 1 ນາທີທີ່ 60 ° C, ການຂະຫຍາຍ, ແລະ fluorescence. ການວັດແທກໄດ້ຖືກປະຕິບັດເປັນເວລາ 1 ນາທີຢູ່ທີ່ 72 ° C. ຕົວຢ່າງທັງຫມົດໄດ້ຖືກຂະຫຍາຍອອກສາມຄັ້ງແລະຄ່າສະເລ່ຍໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການວິເຄາະ RT-qPCR. ຂໍ້ມູນການຂະຫຍາຍໄດ້ຖືກວິເຄາະໂດຍໃຊ້ FlexStation 3 (ອຸປະກອນໂມເລກຸນ, Sunnyvale, CA, USA). IL-4, IL-17, ແລະ IFN-γ gene ການສະແດງອອກໄດ້ຖືກເຮັດໃຫ້ເປັນປົກກະຕິກັບການຄວບຄຸມ endogenous (ACTB). ລະດັບການສະແດງອອກທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຂອງ mRNA ເປົ້າຫມາຍໄດ້ຖືກຄິດໄລ່ໂດຍໃຊ້ວິທີການ 2-ΔΔCT.
ທາດໂປຼຕີນທັງໝົດໄດ້ຖືກສະກັດອອກຈາກເນື້ອເຍື່ອໂດຍໃຊ້ຕົວຊ່ວຍ homogenizer ຂອງເນື້ອເຍື່ອໃນ RIPA lysis buffer (ປະກອບດ້ວຍ protease ແລະ phosphatase inhibitor cocktail) ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ centrifuged ທີ່ 13,000 rpm ເປັນເວລາ 20 ນາທີຢູ່ທີ່ 4 ° C ເພື່ອເອົາສິ່ງເສດເຫຼືອຂອງເນື້ອເຍື່ອອອກ. ຫ້າສິບ micrograms ຂອງທາດໂປຼຕີນໄດ້ຖືກໂຫລດຕໍ່ເສັ້ນ, ແຍກອອກໂດຍ 10% SDS-PAGE, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນໂອນເຂົ້າໄປໃນເຍື່ອ PVDF. ການຂັດຂວາງໄດ້ຖືກປະຕິບັດໃນນົມແຫ້ງທີ່ບໍ່ມີໄຂມັນ 5% ໃນ Tris-buffered saline (TBS) ທີ່ມີ 0.1% Tween 20 ສໍາລັບ 1 ຊົ່ວໂມງໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ. ເຍື່ອໄດ້ຖືກ incubated ກັບ rabbits anti-decorin ພູມຕ້ານທານປະຖົມ (ເຈືອຈາງ 1:200; Boster, Wuhan, ຈີນ) (ເຈືອຈາງ 1:200; Bioss, ປັກກິ່ງ, ຈີນ) ຄືນທີ່ 4 ° C ແລະ reacted ໃນມື້ທີສອງ; ດ້ວຍພູມຕ້ານທານຂັ້ນສອງ (immunoglobulin G ແບ້ຕ້ານກັບ 1: 40,000 ເຈືອຈາງ) ສົມທົບກັບ horseradish peroxidase (Boster, Wuhan, ຈີນ) ສໍາລັບ 1 ຊົ່ວໂມງໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ. ສັນຍານ blot ຕາເວັນຕົກໄດ້ຖືກກວດພົບໂດຍການເພີ່ມ chemiluminescence ໃນເຍື່ອ chemiluminescent ຫຼັງຈາກ irradiation X-ray. ສໍາລັບການວິເຄາະ densitometric, blots ໄດ້ຖືກສະແກນແລະກໍານົດປະລິມານໂດຍໃຊ້ຊອບແວ BandScan ແລະຜົນໄດ້ຮັບໄດ້ຖືກສະແດງອອກເປັນອັດຕາສ່ວນຂອງພູມຕ້ານທານຂອງເຊື້ອສາຍເປົ້າຫມາຍຕໍ່ພູມຕ້ານທານ tubulin.
ການຄິດໄລ່ທາງສະຖິຕິໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ຊຸດຊອບແວ SPSS16.0 (SPSS, USA). ຂໍ້ມູນທີ່ເກັບກໍາໃນລະຫວ່າງການສຶກສາໄດ້ຖືກສະແດງອອກເປັນມາດຕະຖານ ± deviation ມາດຕະຖານ (mean ± SD) ແລະການວິເຄາະໂດຍໃຊ້ການວິເຄາະມາດຕະການຊ້ໍາກັນທາງດຽວ (ANOVA) ເພື່ອກໍານົດຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງສອງກຸ່ມ. P < 0.05 ຖືກຖືວ່າມີຄວາມສໍາຄັນທາງສະຖິຕິ.
ດັ່ງນັ້ນ, ການສ້າງຕົວແບບສັດຂອງ MC ໂດຍການປູກຝັງ NPs autologous ເຂົ້າໄປໃນກະດູກສັນຫຼັງແລະປະຕິບັດການສັງເກດການ macroanatomical, ການວິເຄາະ MRI, ການປະເມີນ histological ແລະການວິເຄາະທາງຊີວະພາບໂມເລກຸນອາດຈະກາຍເປັນເຄື່ອງມືທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບການປະເມີນແລະຄວາມເຂົ້າໃຈກົນໄກຂອງ MC ຂອງມະນຸດແລະການພັດທະນາການປິ່ນປົວໃຫມ່. ການແຊກແຊງ.
ວິທີການອ້າງອີງບົດຄວາມນີ້: Han, C. et al. ຮູບແບບສັດຂອງການປ່ຽນແປງ Modic ໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນໂດຍການປູກຝັງ autologous nucleus pulposus ເຂົ້າໄປໃນກະດູກ subchondral ຂອງກະດູກສັນຫຼັງ lumbar. ວິທະຍາສາດ. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., ແລະ Boos, N. ການຖ່າຍພາບສະທ້ອນຈາກສະນະແມ່ເຫຼັກຂອງກະດູກສັນຫຼັງ lumbar: ອັດຕາການແຜ່ກະຈາຍຂອງແຜ່ນດິດ ແລະການຮັກສາໄວ້, ການບີບອັດຂອງຮາກເສັ້ນປະສາດ, ຄວາມຜິດປົກກະຕິຂອງແຜ່ນທ້າຍ, ແລະໂລກຂໍ້ອັກເສບກະດູກຫັກຮ່ວມກັນ facet ໃນອາສາສະໝັກທີ່ບໍ່ສະແດງອາການ. . ອັດຕາ. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, ແລະ Leboeuf-Eed, K. Modic ການປ່ຽນແປງແລະຄວາມສໍາພັນຂອງເຂົາເຈົ້າກັບການຄົ້ນພົບທາງດ້ານຄລີນິກ. ວາລະສານກະດູກສັນຫຼັງເອີຣົບ: ການພິມເຜີຍແຜ່ຢ່າງເປັນທາງການຂອງສະມາຄົມກະດູກສັນຫຼັງເອີຣົບ, ສະມາຄົມການຜິດປົກກະຕິກະດູກສັນຫຼັງຂອງເອີຣົບ, ແລະສະມາຄົມເອີຣົບສໍາລັບການຄົ້ນຄວ້າກະດູກສັນຫຼັງຂອງປາກມົດລູກ 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. ການປ່ຽນແປງຂອງ Modic ໃນ endplates vertebral lumbar: ອັດຕາສ່ວນແລະການພົວພັນກັບການເຈັບປວດກັບຄືນໄປບ່ອນຕ່ໍາແລະ sciatica ໃນພະນັກງານຜູ້ຊາຍອາຍຸກາງ. ກະດູກສັນຫຼັງ 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., ແລະ Dalinka, M. MRI ຂອງການປ່ຽນແປງຂອງກະດູກຢູ່ໃກ້ກັບແຜ່ນສຸດທ້າຍໃນພະຍາດ degenerative ຂອງກະດູກສັນຫຼັງ lumbar. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, ແລະ Carter, JR Degenerative disc disease: ການປະເມີນການປ່ຽນແປງຂອງກະດູກສັນຫຼັງດ້ວຍ MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, ແລະ Carter, JR ຮູບພາບຂອງພະຍາດແຜ່ນ degenerative. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. ການຄາດຄະເນຂອງສັນຍານ endplate neovertebral (Modic) ການປ່ຽນແປງໃນປະຊາກອນທົ່ວໄປ. ວາລະສານກະດູກສັນຫຼັງເອີຣົບ: ການພິມເຜີຍແຜ່ຢ່າງເປັນທາງການຂອງສະມາຄົມກະດູກສັນຫຼັງຂອງເອີຣົບ, ສະມາຄົມການຜິດປົກກະຕິກະດູກສັນຫຼັງຂອງເອີຣົບ, ແລະສະມາຄົມເອີຣົບສໍາລັບການຄົ້ນຄວ້າກະດູກສັນຫຼັງ, ພະແນກ 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB ແລະ Mannisch, K. Modic ມີການປ່ຽນແປງຫຼັງຈາກ herniation disc lumbar. ວາລະສານກະດູກສັນຫຼັງເອີຣົບ : ການພິມເຜີຍແຜ່ຢ່າງເປັນທາງການຂອງສະມາຄົມກະດູກສັນຫຼັງເອີຣົບ, ສະມາຄົມການຜິດປົກກະຕິຂອງກະດູກສັນຫຼັງຂອງເອີຣົບແລະສະມາຄົມເອີຣົບສໍາລັບການຄົ້ນຄວ້າກະດູກສັນຫຼັງຂອງປາກມົດລູກ 16, 977-982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., ແລະ Kaapa, E. Modic type I ການປ່ຽນແປງສາມາດຄາດຄະເນການເສື່ອມໂຊມຂອງແຜ່ນດິດທີ່ກ້າວຫນ້າຢ່າງໄວວາ: ການສຶກສາຄວາມສົດໃສດ້ານ 1 ປີ. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ ແລະພັດລົມ, ການປ່ຽນແປງ SW Modic: ສາເຫດທີ່ເປັນໄປໄດ້ແລະການປະກອບສ່ວນຂອງ lumbar disc degeneration. ສົມມຸດຕິຖານທາງການແພດ 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Internal disc rupture. Disc prolapse ບັນຫາໃນໄລຍະ 50 ປີ. ກະດູກສັນຫຼັງ (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
ເວລາປະກາດ: 13-12-2024